高通量测序(High-throughput sequencing,HTS)又称为二代测序(next generation sequencing,NGS ), 一次可对几十万到几百万条核酸分子进行序列测定,是对传统Sanger测序(称为一代测序技术)革命性的改变。

高通量测序(NGS)的应用种类繁多,常见的如基因组测序、外显子组测序、转录组(mRNA)测序、microRNA测序、甲基化测序、ChIP-Seq、单细胞测序等等。

完整的高通量测序(NGS)工作流程包含5个环节:核酸提取,文库制备,簇生成,测序,数据分析。

在文库制备 (Library Construction)环节中,由于连接酶的效率问题,连接反应必定是不完整的。除了两端都有接头的完整产物外,还会生成一定比例的多种副产物。对连接产物进行纯化,选出完整的连接产物,对下一步反应的顺利进行至关重要。纯化方法有多种,目前人们更倾向于用磁珠纯化法。